稀释涂布平板法需要酵母菌培养，直到培养基表面形成菌落，所需时间较长。酵母是基因克隆实验中常用的真核生物受体细胞，培养酵母菌和培养大肠杆菌一样方便。酵母克隆载体的种类也很多。酵母菌也有质粒存在，这种2微米长的质粒称为2微米质粒，约6300bp。这种质粒至少有一段时间存在于细胞核内染色体以外，利用2微米质粒和大肠杆菌中的质粒可以构建成能穿梭于细菌与酵母菌细胞之间的穿梭质粒。酵母克隆载体都是在这个基础上构建的。